المحتوى

• خطوات

في الكيمياء ، التخفيف هو عملية تقلل من تركيز المادة في المحلول. عندما يتم القيام به في سلسلة ، فهو عبارة عن تخفيف متكرر لمحلول يزيد بسرعة عامل التخفيف. وعادة ما يتم إجراؤه في تجارب تتطلب محاليل مخففة بدرجة عالية وبدقة كبيرة ، مثل تلك التي تتضمن منحنيات تركيز على مقياس لوغاريتمي أو لتحديد كثافة البكتيريا. بالإضافة إلى ذلك ، يتم استخدامه على نطاق واسع في العلوم التجريبية مثل الكيمياء الحيوية وعلم الأحياء الدقيقة وعلم الأدوية والفيزياء.

خطوات

طريقة 1 من 2: إجراء تخفيف أساسي

1. 

   حدد السائل المثالي للتخفيف. السائل الذي سيتم تخفيف المادة فيه مهم جدا. سيتم تخفيف العديد من المحاليل في الماء المقطر ، ولكن لن يكون هذا هو الحال دائمًا. إذا كان التخفيف من البكتيريا أو الخلايا الأخرى ، فمن المحتمل أن يتم تخفيفها في وسط مستنبت. سيتم استخدام السائل المختار لكل تخفيف متسلسل.
   • إذا لم تكن متأكدًا من السائل الذي يجب استخدامه ، فاطلب المساعدة أو ابحث على الإنترنت لمعرفة ما إذا كان الآخرون قد أجروا بالفعل تخفيفًا مشابهًا.

2. 

   
   
   تحضير عدة أنابيب اختبار مع 9 مل من سائل التخفيف. ستكون هذه الأنابيب عينات نقية للتخفيف. ستتم إضافة العينة غير المخففة إلى الأنبوب الأول ثم يتم تخفيفها بشكل متسلسل في الأنابيب التالية.
   • من الأساليب المفيدة تصنيف جميع الأنابيب قبل البدء حتى لا يحدث أي ارتباك بعد بدء التخفيف.
   • سيحتوي كل أنبوب على تخفيف بمقدار عشرة أضعاف للأنبوب غير المخفف. سيكون الأنبوب الأول تخفيفًا بنسبة "1:10" ، أما الأنبوب الثاني فسيكون تخفيفًا "1: 100" ، والثالث عبارة عن خليط "1: 1000" ، وهكذا. ومع ذلك ، حدد مسبقًا عدد التخفيفات اللازمة لتجنب إهدار الأنابيب أو تخفيف السائل.

3. 

   
   
   قم بإعداد أنبوب اختبار يحتوي على 2 مل على الأقل من المحلول غير المخفف. الحد الأدنى للمبلغ المطلوب لإجراء هذا التخفيف التسلسلي هو 1 مل من المحلول غير المخفف. ومع ذلك ، إذا كان هناك 1 مل فقط فلن يتبقى شيء من المحلول. قم بتسمية هذا الأنبوب بـ "SND" لـ "محلول غير مخفف".
   • اخلطي المحلول جيدًا قبل البدء في أي تخفيف.

4. 

   
   
   قم بعمل التخفيف الأول. استخدم ماصة لنقل 1 مل من المحلول غير المخفف من أنبوب الاختبار "SND" إلى أنبوب الاختبار المسمى "1:10" ، والذي يحتوي على 9 مل من سائل التخفيف ، وامزج جيدًا. يوجد الآن 1 مل من المحلول غير المخفف في 9 مل من سائل التخفيف. لذلك ، تم تخفيف المحلول بمعامل عشرة.

5. 

   قم بعمل التخفيف الثاني. في هذا الجزء من التخفيف التسلسلي ، قم بتمرير 1 مل من المحلول من الأنبوب "1:10" إلى الأنبوب "1: 100" ، الذي يحتوي على 9 مل من سائل التخفيف. ومع ذلك ، امزج الأنبوب "1:10" جيدًا قبل تمرير السائل إلى الأنبوب التالي. ثم بعد التخفيف ، اخلط الأنبوب أيضًا "1: 100". وبهذه الطريقة ، تم تخفيف المحلول الموجود في أنبوب الاختبار "1:10" عشر مرات في أنبوب "1: 100".

6. 

   قم بتمديد الإجراء لإجراء تخفيفات تسلسلية أكبر. يمكن تكرار هذه العملية عدة مرات حسب الضرورة حتى الوصول إلى الحل المطلوب. في تجربة تتضمن منحنيات تركيز ، من الممكن استخدام تخفيف متسلسل لإنشاء سلسلة من المحاليل بتخفيف 1 ، "1:10" ، "1: 100" و "1: 1000".

طريقة 2 من 2: حساب عامل التخفيف النهائي والتركيز

1. 

   احسب نسبة من التخفيف النهائي للتخفيف التسلسلي. يمكن تحديد نسبة التخفيف الكلية بضرب عامل التخفيف لكل خطوة إلى الخطوة النهائية. يمكن توضيح ذلك رياضيا من خلال المعادلة د_ر = د₁ وجه ضاحك₂ وجه ضاحك₃ س ... س د_ن أين د_ر هو عامل التخفيف الكلي و د_ن هي نسبة التخفيف.
   • على سبيل المثال ، لنفترض أنك قمت بعمل تخفيف "1:10" للسائل أربع مرات. اربط عامل التخفيف بالمعادلة: د_ر = 10 × 10 × 10 × 10 = 10000.
   • عامل التخفيف النهائي للأنبوب الرابع في التخفيف التسلسلي هو "1: 10000". تركيز المادة الآن أقل بعشرة آلاف مرة من المحلول الأصلي غير المخفف.

2. 

   تحديد تركيز المحلول بعد التخفيف. لتحديد التركيز النهائي للمحلول بعد التخفيف المتسلسل ، سيكون من الضروري معرفة التركيز الأولي. المعادلة كالتالي: ج_نهائي = ج_مبدئي / د أين ج_نهائي هو التركيز النهائي للمحلول المخفف ، ج_مبدئي هو التركيز الأولي للمحلول الأصلي و د هي النسبة المحددة سلفًا للتخفيف.
   • على سبيل المثال: إذا كان محلول الخلية الأولي يحتوي على تركيز 1،000،000 خلية لكل مللي ونسبة التخفيف 1000 ، فما هو التركيز النهائي للعينة المخففة؟
   • استخدم المعادلة:
     • ج_نهائي = ج_مبدئي / د
     • ج_نهائي = 1.000.000 / 1000
     • ج_نهائي = 1000 خلية لكل مل

3. 

   
   
   تأكد من تطابق جميع الوحدات. عند إجراء أي عملية حسابية ، من الضروري أن تتطابق الوحدات دائمًا في النهاية. إذا بدأت بخلايا لكل مل ، فحاول أن تنتهي بخلايا لكل مل. إذا كان التركيز الأولي هو جزء في المليون (جزء في المليون) ، فيجب أن يكون التركيز النهائي أيضًا جزءًا في المليون.